Obróbka tkanek do badań histologicznych

Pobranie materiału histologicznego do badań

Przetwarzanie tkanek jest bardzo ważną częścią każdego laboratorium histologicznego i rozpoczyna się od uzyskania badanej tkanki. W przypadku tkanek roślinnych próbki różnych organów tworzących ciało rośliny pobiera się bezpośrednio, podczas gdy tkanki ludzkie i zwierzęce można uzyskać na różne sposoby poprzez biopsje (wycięcie, nacięcie, endoskopia, kolposkopia itp.) oraz przez sekcję zwłok / sekcję zwłok.

Utrwalenie tkanki

Próbki są zwykle utrwalane za pomocą płynnych roztworów zwanych utrwalaczami, które służą do utrzymania niezmienionych struktur komórkowych i molekularnych podczas dalszego przetwarzania oraz z organizacją możliwie najbardziej zbliżoną do tej, jaka była w żywej próbce.

Myje

Tkankę należy przemyć w celu usunięcia nadmiaru utrwalacza (chemicznego). Nadmiar utrwalacza podczas późniejszego procesu infiltracji, nawet w mikrotomii, może wpływać na nacięcia histologiczne, dlatego należy je przemyć wodą destylowaną.

Odwodnienie

Odwadnianie przeprowadza się przy użyciu różnych roztworów alkoholowych o rosnących stężeniach, aż do uzyskania czystego alkoholu.

Clearing

Na tym etapie alkohol zostaje zastąpiony substancją pośredniczącą między wodą a parafiną, która zostanie później wykorzystana do infiltracji. Powszechnie stosowaną substancją jest ksylol, chociaż można również stosować inne rozpuszczalniki organiczne, takie jak benzen. Podczas tego procesu tkanka traci kolor, co skutkuje terminem klirensu.

Infiltracja

Próbkę umieszcza się w parafinie histologicznej w stanie ciekłym, co uzyskuje się poprzez podgrzanie parafiny powyżej jej temperatury topnienia. Odwadnianie, oczyszczanie i infiltracja mogą być wykonywane ręcznie, ale obecnie są wykonywane automatycznie na specjalnych maszynach.

Inkluzywność i sprawiedliwość społeczna

Jego zadaniem jest zapewnienie tkaninie solidnego podparcia umożliwiającego wykonanie bardzo drobnego cięcia, dlatego bardzo ważne jest, aby medium użyte do inkluzji wniknęło w tkankę. Osiąga się to poprzez zatopienie tkanki w płynnych substancjach, które następnie polimeryzują (żywice) lub stają się spójne (woski).

Mikrotomia

Po włączeniu lub zamrożeniu tkanki są cięte, to znaczy uzyskiwane są skrawki. Istnieją różne urządzenia tnące, które umożliwiają uzyskiwanie skrawków o różnej grubości: ultracienkie (rzędu nm), półcienkie (0.5 do 2 µm), cienkie (pomiędzy 3 a 10 µm) i grube (większe niż 10 µm). µm).

Barwiący

Same komórki nie mają zabarwienia. Dlatego, aby obserwować morfologię tkanek, trzeba je „farbować”. Istnieje wiele rodzajów barwników służących do różnicowania różnych struktur lub substancji w tkankach.

Najczęściej stosowanymi barwnikami są hematoksylina i eozyna. Hematoksylina barwi kwaśne substancje lub struktury, które je zawierają, takie jak jądro zawierające kwas dezoksyrybonukleinowy (DNA), a eozyna barwi podstawowe struktury, takie jak cytoplazma i inne eozynofilowe organelle w komórce.

Obserwacja

Przetworzone tkanki obserwuje się pod mikroskopem. Istnieją dwa podstawowe typy mikroskopów: optyczny i elektroniczny. Te pierwsze oferują dużą wszechstronność w zakresie sposobów obserwacji tkanek, podczas gdy te drugie pozwalają na wysoką rozdzielczość, umożliwiając obserwację cech ultrastrukturalnych, takich jak błony komórkowe, a nawet kompleksy molekularne.

Technika histologiczna jest szeroko stosowana w laboratoriach i szpitalach. Pozwala diagnozować różne choroby, na przykład wiedzieć, czy guz jest złośliwy, czy łagodny itp.

Procesor tkankowy jest instrumentem używanym do analizy i przetwarzania próbek poprzez ich utrwalanie, barwienie, odwadnianie lub odwapnianie.

Urządzenia te ewoluowały powoli, aby były bezpieczniejsze w użyciu, obsługiwały większą liczbę próbek, przetwarzały szybciej i dawały wyniki lepszej jakości. Większość nowoczesnych procesorów do przenoszenia płynów wykorzystuje wysokie temperatury, efektywną cyrkulację płynu i zawiera cykle podciśnienia/ciśnienia, aby usprawnić przetwarzanie i skrócić czas przetwarzania.

W Kalstein mamy dostępne procesory tkankowe, które są bardzo przydatne w laboratorium histologicznym. Możesz uzyskać pełniejsze informacje na ich temat, klikając poniższy link TUTAJ