Elektroforeza żelowa jest techniką laboratoryjną stosowaną w genetyce do rozdzielania mieszanin zawierających DNA, RNA i inne białka zgodnie z ich rozmiarem i ładunkiem cząsteczkowym. DNA, RNA lub białka, które muszą zostać rozdzielone w tej metodzie, są przepuszczane przez żel zawierający małe pory. Cząsteczki są napędzane przez żel przez pole elektryczne.
Pozioma elektroforeza żelowa
Pozioma elektroforeza żelowa wykorzystuje podstawową teorię rozdziału cząsteczek DNA, RNA lub białek zgodnie z ich wielkością i ładunkiem. W tej technice żel występuje w orientacji poziomej i jest zanurzony w ciągłym buforze. Żel agarozowy służy do rozdzielenia pudełka z żelem na dwie komory. Jeden koniec pudełka z żelem zawiera anodę, a drugi koniec zawiera katodę. Po przyłożeniu prądu bufor używany w tej technice umożliwia utworzenie gradientu ładunku. Po przyłożeniu obciążenia żel ma tendencję do nagrzewania się.
Bufor działa również jako chłodziwo, utrzymując temperaturę na optymalnym poziomie. Recyrkulacja buforu roboczego zapobiega tworzeniu się gradientu pH. Nieciągły system buforowy nie może być stosowany w poziomej elektroforezie żelowej, ponieważ dwa przedziały systemu żelowego łączą się z buforem roboczym.
W poziomej elektroforezie żelowej nie można stosować akryloamidu, ponieważ pudełko z żelem jest wystawione na działanie tlenu. Ze względu na obecność tlenu hamowana jest polimeryzacja akryloamidu, co utrudnia tworzenie żelu. Pozioma elektroforeza żelowa jest łatwą w użyciu metodą rozdziału DNA i RNA.
Pionowa elektroforeza żelowas
Technika pionowej elektroforezy żelowej działa zgodnie z pierwotną teorią elektroforezy żelowej, ale jest uważana za bardziej złożoną niż metoda poziomej elektroforezy żelowej. Ta technika wykorzystuje nieciągły bufor. Katoda znajduje się w górnej komorze, a anoda w dolnej komorze. Elektrody obecne w każdym przedziale zapewniają wymagane pole elektryczne. Cienka warstwa żelu jest wlewana pomiędzy dwie zamontowane płytki szklane. Dlatego górna część żelu jest zanurzona w górnej komorze, a dolna część żelu jest zanurzona w dolnej komorze. Po przyłożeniu prądu niewielka część buforu przemieszcza się do dolnej komory z górnej komory przez żel.
W pionowej elektroforezie żelowej bufor przepływa tylko przez żel. Pozwala to na precyzyjną kontrolę gradientu napięcia podczas etapu separacji. Można stosować żel akryloamidowy, ponieważ przedziały nie są wystawione na działanie tlenu atmosferycznego. Ze względu na mniejszy rozmiar porów żelu akryloamidowego, precyzyjną separację można osiągnąć przy wyższej rozdzielczości.
At Kalsteina jesteśmy PRODUCENTAMI, więc możesz KUPIĆ doskonałe systemy do elektroforezy do swojego laboratorium w doskonałych CENACH. Dlatego zapraszamy do zapoznania się z naszym sprzętem dostępnym w menu Produkty.TUTAJ
