Kalibracja termocyklerów to ważny proces dbania o nie. Dlatego wszystkie punkty widzenia muszą być jasne, aby skalibrować jeden z nich. Wśród nich są punkty widzenia biologii molekularnej, które koncentrują się na kopiowaniu reakcji PCR do poglądów metrologów.

Dlatego kalibracja musi być przeprowadzona przez wykwalifikowany personel, to znaczy żadna zwykła osoba nie może jej spróbować. Pamiętaj, że do tego służą lata nauki. Widoki powinny być również wykonywane w określonych warunkach środowiskowych, które na to pozwalają, a także okoliczności.

Kalibracja poprzez imitację procesu PCR

Jeśli spojrzymy na to z perspektywy biologa molekularnego, jest to najlepszy sposób na kalibrację dowolnego termocyklera, o ile jest to proces naśladujący proces PCR. Prawidłowy proces polega na umieszczeniu tuvos w studzienkach blokowych, napełnieniu mieszaniną reakcyjną i umieszczeniu czujników. Następnie przystąpić do zamykania probówek i termocyklerów osłoną termiczną w celu opracowania protokołu PCR stosowanego w laboratorium.

Cały ten proces musi odbywać się w rzeczywistej temperaturze w probówce wypełnionej określoną mieszaniną reakcyjną. Wszystko to musi się wydarzyć podczas protokołu PCR przeprowadzanego z konkretnego instrumentu.

Każdą kombinację mieszanek, lub do momentu, w którym należy powtórzyć protokół i przyrząd do kalibracji. To znacznie zwiększa obciążenie pracą. Dlatego wyników nie można nawet porównywać między nimi. Nawet do jakiejkolwiek normy lub specyfikacji ustalonej przez producenta.

Należy pamiętać, że ten sposób kalibracji dosłownie zebrałby wiele zmiennych poza kontrolą. Dlatego dodanie dużej składowej niepewności jest najlepszym sposobem na zakończenie niepewności, które mieszczą się w przedziale powyżej 2°C. Teraz, gdy niepewność wynosi około 2°C, a jednocześnie pomiar 96°C , zdarza się, że temperatura termocyklera może występować w dowolnym zakresie pomiędzy 94 ºC a 98 ºC.

Należy również pamiętać, że różnica temperatur może mieć wpływ na inaktywację polimerazy Taq. Dlatego poziom niepewności w kalibracji termocyklera wcale nie jest przyjemny. Jeśli jednak proces PCR zostanie skopiowany, może się to wydawać kuszącą opcją.

Reprezentatywna kalibracja procesu

Z perspektywy czasu najlepszym sposobem kalibracji przyrządu, takiego jak termocykler, jest reprezentatywny i standardowy pomiar procesu PCR. Metoda pozwala na kalibrację wszystkich standardowych PCR. Podczas procesu PCR należy wziąć pod uwagę dynamikę i jej część statyczną. Jest to ważne, ponieważ istnieją problemy, których nie można dostrzec gołym okiem, a raczej przy statycznej kontroli PCR.

Temperatury bliskie denaturacji, elongacji i hybrydyzacji powinny być oceniane jedna po drugiej. Ich efekty mogą się różnić w zależności od temperatury.

Kalibracja zgodnie z międzynarodowymi standardami

Jeśli pracujesz w obszarze meteorologicznym, może to być idealne miejsce do kalibracji termocyklera. W przypadku meteorologów kalibrację definiuje się jako czynności niezbędne w określonych warunkach.

Podczas tego procesu identyfikowalność jest gwarantowana poprzez stosowanie wzorców odniesienia i wyrażanie wartości, które odpowiadają za kalibrację w jednostkach SI. Jednak również z powodu tej niepewności wyliczonej z wyniku kalibracji. Oprócz tego, że te same kalibracje wykonują tylko inżynierowie specjalizujący się w kalibracji, którzy są dosłownie kompetentni i wykwalifikowani do wykonywania takich czynności.

Jak sprawdzić, czy kalibracja jest całkowicie bezpieczna

• Kalibracja musi być mierzona z charakterystyką termiczną, która obejmuje wynik PCR. Wśród nich dokładność, nadmiar lub zasięg, prędkość chłodnego nagrzewania, czas retencji i jednorodność.
• Należy przeprowadzić proces dynamiczny zamiast statycznego.
• Niezbędne jest wykonanie kilku kanałów, aby wykluczyć efekty czasowe między dołkami.
• Bardzo ważne jest, aby mieć kontrolowane warunki środowiskowe.
• Upoważniony personel musi posiadać niezbędne doświadczenie do wykonywania tych czynności.

In Kalsteina posiadamy Termocyklery o najwyższej technologii i niezawodności, które pozwolą uzyskać najlepszy PCR. Dlatego zapraszamy do obejrzenia TUTAJ